Deoxycholate Citrate Agar Дезоксихолат-цитратный агар

М065 / М065A

 

Эту среду используют для селективного выделения возбудителей кишечных инфекций, в первую очередь сальмонелл и шигелл.

Рост на среде Deoxycholate Citrate Agar (M065) Escherichia coli (розовые колонии) и Salmonella серовара Typhi (темные - H2S+ колонии)

 

Состав**:

Ингредиенты	М065 грамм/литр	М065А грамм/литр
Настой сердца (порошок)	10,00	–
Протеозопептон	10,00	–
Пептический перевар животной ткани	–	10,00
Мясной экстракт	–	10,00
Лактоза	10,00	10,00
Натрия цитрат	20,00	20,00
Железа аммонийного цитрат	2,00	–
Железа цитрат	–	1,00
Натрия дезоксихолат	5,00	5,00
Нейтральный красный	0,02	0,02
Агар-агар	13,50	13,50
Конечное значение рН (при 25°С)	7,5 ± 0,2	7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 70,52 г порошка М065 или 69,52 порошка М065А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Избегать перегревания среды.

Принцип и оценка результата:

Этот агар готовят по модифицированной прописи Leifson (1). Его используют для селективного выделения возбудителей сальмонеллеза и шигеллеза из пищевых продуктов (2). Вместе с тем для выделения шигелл рекомендуют использовать менее селективные среды (3). Высокая селективность позволяет густо засевать эту среду без опасения обильного роста сопутствующей микрофлоры. Для обычных исследований фекалий или мочи, наряду с этой средой рекомендуется применять другие, например, агар МакКонки (M082) или Висмут-сульфитный агар (M027).

Эта среда похожа на дезоксихолатный агар, но имеет большую селективность ввиду более высокой концентрации цитратов и дезоксихолата. Дезоксихолат натрия при рН 7,3-7,5 подавляет рост грамположительных бактерий. Цитраты в указанных концентрациях подавляют рост грамположительных и большинства грамотрицательных кишечных бактерий. Лактозоотрицательные бактерии формируют на этой среде бесцветные колонии. Колиформные бактерии в случае роста образуют розовые колонии. Восстановление цитрата аммонийного железа в присутствии сероводорода, образованного микроорганизмами, приводит к образованию сульфида железа и, соответственно, почернению центра колоний.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий розоватый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет оранжево-красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М065 (7,0% вес/об) имеет рН 7,5 ± 0,2, М065 (6,95% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2,.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний	H2S
Salmonella enteritidis (13076)	Обильный	Бесцветные	+
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	Бесцветные	+
Shigella flexneri (12022)	Хороший	Бесцветные	–
Escherichia coli (25922)	Слабый	Розовые с преципитатом вокруг	–
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–	–

Ссылки:

1. Leifson, 1935, J. Path. Bact., 40:581.
2. Speck M. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., APHA, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.