Gelatin Phosphate Salt Agar (GPS) Фосфатно-солевой желатиновый агар

М921

 

Этот агар рекомендуют для изучения характеристик холерных вибрионов из пищевых продуктов.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Желатин	10,00
Натрия хлорид	10,00
Калия гидрофосфат	5,00
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 40,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в соответствующие пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Этот неселективный агар рекомендован специалистами АРНА (1) для посева на чашки обогащенных культур холерных вибрионов из морепродуктов и овощей. Продуцируемая вибрионами желатиназа расщепляет желатин, в результате чего на агаре образуются мелкие прозрачные колонии, окруженные зоной помутнения. Желатиназаотрицательные бактерии на этой среде могут в виде сателлитного роста окружать колонии Vibrio cholerae. Фосфат придает буферность среде, хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление.

Для обогащения и высева на чашки навески образцов по 25,0 г измельченной средней пробы морепродуктов или овощей помещают в 2 флакона емкостью 500 мл, в один из которых добавляют 225 мл Фосфатно-солевого желатинового бульона, а в другой – такое же количество Щелочной пептонной воды (М618). Тщательно перемешивают и инкубируют в течение 8 ч при 35°С ± 2°С.

Затем (при необходимости) определяют наиболее вероятное число бактерий. Готовят подсушенные чашки с такими неселективными и селективными средами, как Агар TCBS (М189), Фосфатно-солевой желатиновый агар, Целлобиозный агар с полимиксином и колистином (М1241), Сахарозный агар с полимиксином и додецилсульфатом (М1155). Из верхней части каждого флакона материал высевают петлей штрихами на 2 чашечные среды и инкубируют течение 18-24 ч при 35°С. Колонии с чашечных сред отсевают на скошенный агар TN (М950) или столбики Среды для определения подвижности (М260) и инкубируют в течение ночи при 35°С ± 2°С.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,0% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Vibrio cholerae (15748)	Хороший или обильный

Ссылки:

1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington,D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.